Цель. Изучить влияние температурных режимов хранения (-20 и -70 оC) и длительности экспозиции (6 мес. и 6 лет) на сохранность и стабильность специфических антител класса IgG к HBs-антигену вируса гепатита В (анти-HBs IgG) в образцах сывороток крови, хранящихся в биобанке.Материал и методы. Проведено экспериментальное исследование 180 образцов сыворотки крови. Уровень анти-HBs IgG определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-систем ЗАО "Вектор-Бест" (Россия) в нативных образцах и после хранения в соответствии с двумя сценариями: 1) хранение при -20 и -70 оС в течение 6 мес.; 2) хранение при -70 оС в течение 6 мес. и 6 лет. Статистический анализ проводили с использованием непараметрических методов (критерий Уилкоксона, медиана, интерквартильный размах, коэффициент корреляции Спирмена).Результаты. В исследовании по первому сценарию установлено, что хранение при -20 оС в течение 6 мес. привело к почти 2-кратному увеличению медианного уровня анти-HBs IgG (с 35,5 (7,8-76,8) до 65,3 (26,0-105,0) МЕ/мл) и появлению 9 ложноположительных результатов. В исследовании по второму сценарию хранение при -70 оС в течение 6 мес. сопровождалось незначительным снижением уровня антител (с 72,5 (27,9-132,0) до 49,3 (4,0-98,4) МЕ/мл) без ложных результатов, а после 6 лет хранения при -70 оС отмечено дальнейшее их снижение до 33,3 (6,15-88,4) МЕ/мл, 2 образца стали ложноотрицательными. Выявлена сильная корреляция между уровнем антител в нативных образцах и после хранения (p=0,97-0,99; p<0,05).Заключение. Долгосрочное (до 6 лет) хранение образцов сыворотки крови при температуре -70 оС является надежным и не вносит критических искажений в результаты популяционных серологических исследований распространенности анти-HBs IgG. Хранение при -20 оС допустимо лишь краткосрочно, т.к. уже через 6 мес. приводит к появлению ложноположительных результатов и завышению среднего уровня антител, что делает его непригодным для биобанкирования.
1. Семененко Т. А., Акимкин В. Г. Сероэпидемиологические исследования в системе надзора за вакциноуправляемыми инфекциями. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018;95(2):87-94. doi:10.36233/0372-9311-2018-2-87-94.
2. Hörber S, Klein R, Peter A. Effects of Long-Term Storage on Serum Free Light Chain Stability. Clin Lab. 2019;65(5). doi:10.7754/Clin.Lab.2018.181107.
3. Козлова В. А., Метельская В. А., Покровская М. С. и др. Изучение стабильности биохимических маркеров при непрерывном длительном хранении сыворотки крови и при однократном размораживании. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2020;19(6): 2736. doi:10.15829/1728-8800-2020-2736.
4. Hendriks J, Stals C, Versteilen A, et al. Stability studies of binding and functional anti-vaccine antibodies. Bioanalysis. 2014; 6(10):1385-93. doi:10.4155/bio.14.96.
5. Olmeda P, Díaz-Regañón D, Villaescusa A, et al. Evaluating the stability of antibody titres against Leishmania infantum determined by IFAT in long-term stored canine frozen samples. Parasit Vectors. 2025;18(1):327. doi:10.1186/s13071-025-06982-x.
6. Engelmaier A, Butterweck HA, Weber A. Stability assessment of anti-bacterial antibodies in immunoglobulin G-depleted serum with validated immunoassays. Immunotherapy. 2023;15(17): 1459-76. doi:10.2217/imt-2023-0127.
7. Laner-Plamberger S, Siller A, Lauth W, et al. Stable SARS-CoV-2 antibody levels and functionality in serum and COVID-19 convalescent plasma after long-term storage. Vox Sang. 2025; 120(8):784-92. doi:10.1111/vox.70059.
8. Shurrab FM, Al-Sadeq DW, Amanullah F, et al. Effect of multiple freeze-thaw cycles on the detection of anti-SARS-CoV-2 IgG antibodies. J Med Microbiol. 2021;70(8):001402. doi:10.1099/jmm.0.001402.
9. Ноздрачева А. В., Семененко Т. А. Оценка надежности результатов серологического мониторинга по материалам биобанка. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2023; 22(11):3709. doi:10.15829/1728-8800-2023-3709.
10. Ноздрачева А. В., Семененко Т. А. Влияние длительного хранения образцов сывороток крови в условиях биобанка для проведения популяционных сероэпидемиологических исследований. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2022;21(11):3407. doi:10.15829/1728-8800-2022-3407.
11. Акимкин В. Г., Семененко Т. А., Никитина Г. Ю. и др. Эпидемиология гепатитов B и C в лечебно-профилактических учреждениях. Москва, Бионика. 2013. с. 216. ISBN: 978-5-9903962-1-0.
12. Tu T, Douglas MW. Hepatitis B Virus Infection: From Diagnostics to Treatments. Viruses. 2020;12(12):1366. doi:10.3390/v12121366.
13. Lin CL, Kao JH. Development of hepatocellular carcinoma in treated and untreated patients with chronic hepatitis B virus infection. Clin Mol Hepatol. 2023;29(3):605-22. doi:10.3350/cmh.2022.0342.
14. Qin Y, Liao P. Hepatitis B virus vaccine breakthrough infection: surveillance of S gene mutants of HBV. Acta Virol. 2018; 62(2):115-21. doi:10.4149/av_2018_210.
15. Баженов А. И., Эльгорт Д. А., Фельдшерова А. А. и др. Выявление антител к мутантным формам HBsAg у лиц, иммунизированных против гепатита В вакцинами разных субтипов. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2011;5(60):49-53.
16. Conners EE, Panagiotakopoulos L, Hofmeister MG, et al. Screening and Testing for Hepatitis B Virus Infection: CDC Recommendations, 2023. MMWR Recomm Rep. 2023;72(1):1-25. doi:10.15585/mmwr.rr7201a1.
17. Кочетова Е. О., Шамшева О. В., Полеско И. В. и др. Особенности формирования специфического иммунитета после вакцинации против вирусного гепатита В у детей и лиц молодого возраста. Лечащий врач. 2023; 26(6):7-15. doi:10.51793/OS.2023.26.6.001.
18. Семененко Т. А. Иммунный ответ при вакцинации против гепатита В у лиц с иммунодефицитными состояниями. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2011;1(56):51-8.
19. Marjani A, Alavian SM, Nassiri Toosi M, et al. Hepatitis B virus infection after immunization: How serious it is? An updated review. Clin Exp Med. 2025;25(1):113. doi:10.1007/s10238-025-01645-8.
20. Соловьев Д. В., Корабельникова М. С., Кудрявцева Е. Н. и др. Серологический мониторинг как индикатор популяционного иммунитета против гепатита В у населения Российской Федерации в 2017-2022гг. Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2024;23(5):24-32. doi:10.31631/2073-3046-2024-23-5-24-32.
21. Cuhadar S, Koseoglu M, AtayA, Dirican A. The effect of storage time and freeze-thaw cycles on the stability of serum samples. Biochem Med. 2013;23(1):70-7. doi:10.11613/bm.2013.009.
22. Anisimov SV, Granstrem OK, Meshkov AN, et al. National association of biobanks and biobanking specialists: new community for promoting biobanking ideas and projects in Russia. Biopreserv Biobank. 2021;19(1):73-82. doi:10.1089/bio.2020.0049.
23. Aladawy AI, Elnakib M, Fattah MA, et al. Impact of -20 оC cryopreservation on serum factors from schistosomiasis patients at different storage durations: insights into serum bio-banking. J Parasit Dis. 2025;49(1):162-72. doi:10.1007/s12639-024-01734-7.
24. Castro AR, Jost HA. Effect of multiple freeze and thaw cycles on the sensitivity of IgG and IgM immunoglobulins in the sera of patients with syphilis. Sex Transm Dis. 2013;40(11):8701. doi:10.1097/OLQ.0000000000000036.
