Цель. Оценить сохранность иммуноглобулинов (Ig) разных классов (IgА, IgМ, IgG, IgЕ) в условиях продолжительного низкотемпературного хранения образцов сыворотки крови.Материал и методы. В работе использованы образцы сывороток крови из коллекции отдела эпидемиологии, исследованные методом иммуноферментного анализа на наличие антител классов IgА, IgМ, IgG, IgЕ двукратно: сразу по поступлению в лабораторию и после хранения при температуре -70о C в течение 8 лет.Результаты. По истечении периода хранения серопозитивных сывороток уровень антител класса IgA статистически значимо не изменился (р=0,7). В отношении остальных классов иммуноглобулинов (IgM, IgG, IgE) наблюдалось небольшое (не >15%), однако статистически значимое снижение их уровня в сыворотке крови (р<0,05), наиболее выраженное для Ig E. Показано, что чем выше был уровень антител в образцах при первом исследовании, тем более он снизился после долгосрочного хранения (корреляционная связь при р<0,05). Это не привело к появлению ложноотрицательных результатов, что связано с выявленной нами большей "точностью" измерения именно небольших значений.Заключение. Длительное низкотемпературное хранение образцов сывороток крови в условиях биобанка обеспечивает сохранность антител разных классов и является основой достоверности результатов будущих исследований.
1. Ma H, Ó'Fágáin C, O'Kennedy R. Antibody stability: A key to performance — Analysis, influences and improvement. Biochimie. 2020;177:21325. doi:10.1016/j.biochi.2020.08.019.
2. Семененко Т. А., Акимкин В. Г. Сероэпидемиологические исследования в системе надзора за вакциноуправляемыми инфекциями. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018;95(2):8794. doi:10.36233/03729311201828794.
3. Анисимов С. В., Ахмеров Т. М., Балановский О. П. и др. Биобанкирование. Национальное руководство. Москва: ООО "Издательство ТРИУМФ", 2022. 308 с. ISBN: 9785936733222.
4. Семененко Т. А., Ананьина Ю. В., Боев Б. В. и др. Банки биологических ресурсов в системе фундаментальных эпидемиологических и клинических исследований. Вестник Российской академии медицинских наук. 2011;10:59.
5. Долудин Ю. В., Борисова А. Л., Покровская М. С. и др. Современные передовые практики и рекомендации по биобанкированию Клиническая лабораторная диагностика. 2019;64(12):76976. doi:10.18821/0869208420196412769776.
6. Покровская М. С., Борисова А. Л., Сивакова О. В. и др. Управление качеством в биобанке. мировые тенденции и опыт биобанка ФГБУ "НМИЦ профилактической медицины" Минздрава России. Клиническая лабораторная диагностика. 2019;64(6):3804. doi:10.18821/086920842019646380384.
7. Anisimov SV, Granstrem OK, Meshkov AN, et al. National association of biobanks and biobanking specialists: new community for promoting biobanking ideas and projects in Russia. Biopreserv Biobank. 2021;19(1):7382. doi:10.1089/bio.2020.0049.
8. Castro AR, Jost HA. Effect of multiple freeze and thaw cycles on the sensitivity of IgG and IgM immunoglobulins in the sera of patients with syphilis. Sex Transm Dis. 2013;40(11):8701. doi:10.1097/OLQ.0000000000000036.
9. Козлова В. А., Метельская В. А., Покровская М. С. и др. Изучение стабильности биохимических маркеров при непрерывном длительном хранении сыворотки крови и при однократном размораживании. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2020;19(6):2736. doi:10.15829/1728880020202736.
10. Vignoli A, Tenori L, Morsiani C, et al. Serum or Plasma (and Which Plasma), That Is the Question. J Proteome Res. 2022;21(4):106172. doi:10.1021/acs.jproteome.1c00935.
11. Rouet R, Lowe D, Christ D. Stability engineering of the human antibody repertoire. FEBS Lett. 2014;588(2):26977. doi:10. 1016/j.febslet.2013.11.029.
12. Correia IR. Stability of IgG isotypes in serum. MAbs. 2010;2(3):22132. doi:10.4161/mabs.2.3.11788.
13. Moggridge J, Biggar K, Dawson N, et al. Sensitive Detection of Immunoglobulin G Stability Using in Real Time Isothermal Differential Scanning Fluorimetry: Determinants of Protein Stability for Antibody Based Therapeutics. Technol Cancer Res Treat. 2017;16(6):9971005. doi:10.1177/1533034617714149.
14. Xiang H, Chan D, Bates R. Minimization of freeze/thawinduced protein aggregation and optimization of a drug substance formulation matrix. BioPharm Int. 2015;28(8):307.
15. Martin P, Colandene J, Pruett WA, et al. Impact of manufacturing scale freezethaw conditions on a mAb solution. BioPharm Int. 2017;30(2):306.
16. Manikwar P, Majumdar R, Hickey JM, et al. Correlating excipient effects on conformational and storage stability of an IgG1 monoclonal antibody with local dynamics as measured by hydrogen/deuteriumexchange mass spectrometry. J Pharm Sci. 2013;102(7):213651. doi:10.1002/jps.23543.
17. Ma H, O'Kennedy R. Generation and optimization of antibodies for use in biosensors/ In: Nanobiosensors for personalized in situ biomedical diagnostics (ed Pranjal Chandra and Esther Sehgal) Institute of Engineering and Technology (IET) Publishing. 2016;20930. ISBN: 9781849199506; e ISBN: 9781849199513. 638 p. doi:10.1049/PBHE001E.
18. Ноздрачева А. В., Семененко Т. А. Влияние длительного хранения образцов сывороток крови в условиях биобанка для проведения популяционных сероэпидемиологических исследований. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2022;21(11):3407. doi:10.15829/1728880020223407.
19. Волошкин А. А., Рыбак Л. А., Ноздрачева А. В. и др. Роботизированная система на базе дельта манипулятора для аликвотирования в закрытых камерах и боксах. Экстремальная робототехника. 2022;1(1):43644.
20. Khalapyan S, Rybak L, Nebolsin V, et al. Robotic System for Blood Serum Aliquoting Based on a Neural Network Model of Machine Vision. Machines. 2023;11(3):349. doi:10.3390/machines11030349.
